ABSTRACT

The aqueous extract of Phyllanthus orbicularis contains bioproducts able to significantly reduce the mutagenesis mediated by oxidative compounds. A bioactive-directed fractionation of the aqueous extract of P. orbicularis has been applied with the aim of identifying antimutagenic fractions, which allowed isolating and identifying some biocompound responsible for this activity. Antimutagenesis of all fractions was determined by the Salmonella retromutation assay, using hydrogen peroxide as model mutagen. Applying this methodology, two potent antimutagenic fractions have been obtained able to totally abolish the mutagenicity produced by hydrogen peroxide. In these fractions 2,4-di-tertbutylphenol, OO’-diphenol-4,4’,6,6’-tetra-tert-butyl and 2,6-di-sec-butylphenol were identified by Gas Chromatography/Mass Spectrometry.

Keywords: P. orbicularis; 2,4-di-tert-butylphenol; OO’-diphenol-4,4’,6,6’-tetra-tert-butyl; 2,6-di-secbutylphenol; antimutagenesis; oxidative damage; chemical fractionation

RESUMEN

El extracto acuoso de Phyllanthus orbicularis es capaz de reducir significativamente la mutagénesis inducida por agentes oxidantes como el peróxido de hidrógeno y aminas aromáticas. Con el objetivo de identificar algún fitocomponente responsable de esta propiedad, se aplicó un fraccionamiento químico del extracto, guiado por el monitoreo de la referida bioactividad. La antimutagenicidad de cada fracción frente al peróxido de hidrógeno se determinó mediante el ensayo de retromutación en la cepa TA102 de Salmonella typhimurium (Test Ames). La identificación de los compuestos específicos se realizó por cromatografía gaseosa y espectrometría de masa. Se obtuvieron dos fracciones con alto grado de pureza cuya actividad antimutagénica fue capaz de abolir totalmente la mutagenicidad producida por el peróxido de hidrógeno. En una de estas fracciones se identificaron los compuestos 2,4-di-ter-butilfenol y su forma dimérica, OO'-diphenol-4,4',6,6'-tetra-ter-butil; en la otra, se identificó un solo compuesto, el 2,6-di-sec-butilfenol. Estos tres metabolitos secundarios pertenecen a la familia fitoquímica de los fenoles, en la cual se incluyen muchos de los agentes antioxidantes informados por la literatura especializada.

Palabras clave: P. orbicularis; 2,4-di-ter-butilfenol; OO’-difenol-4,4’,6,6’-tetra-ter-butil; 2,6-di-sec-butilfenol; antimutagénesis; daño oxidativo; fraccionamiento químico.